Proteoglycan-4 Regulates Fibroblast to Myofibroblast Transition and Expression of Fibrotic Genes in the Synovium

Background: Synovial tissue fibrosis is common in advanced OA with features including the presence of stress fiber-positive myofibroblasts and deposition of cross-linked collagen type-I. Proteoglycan-4 (PRG4) is a mucinous glycoprotein secreted by synovial fibroblasts and is a major component of synovial fluid. PRG4 is a ligand of the CD44 receptor. Our objective was to examine the role of PRG4-CD44 interaction in regulating synovial tissue fibrosis in vitro and in vivo. Methods: OA synoviocytes were treated with TGF-β ± PRG4 for 24h and α-SMA content was determined using immunofluorescence. Rhodamine-labeled rhPRG4 was incubated with OA synoviocytes ± anti-CD44 or isotype control antibodies and cellular uptake of rhPRG4 was determined following a 30-min incubation and α-SMA expression following a 24-h incubation. HEK-TGF-β cells were treated with TGF-β ± rhPRG4 and Smad3 phosphorylation was determined using immunofluorescence and TGF-β/Smad pathway activation was determined colorimetrically. We probed for stress fibers and focal adhesions (FAs) in TGF-β-treated murine fibroblasts and fibroblast migration was quantified ± rhPRG4. Synovial expression of fibrotic markers: α-SMA, collagen type-I, and PLOD2 in Prg4 gene-trap (Prg4GT) and recombined Prg4GTR animals were studied at 2 and 9 months of age. Synovial expression of α-SMA and PLOD2 was determined in 2-month-old Prg4GT/GT&Cd44−/− and Prg4GTR/GTR&Cd44−/− animals. Results: PRG4 reduced α-SMA content in OA synoviocytes (p \u3c 0.001). rhPRG4 was internalized by OA synoviocytes via CD44 and CD44 neutralization attenuated rhPRG4’s antifibrotic effect (p \u3c 0.05). rhPRG4 reduced pSmad3 signal in HEKTGF- β cells (p \u3c 0.001) and TGF-β/Smad pathway activation (p \u3c 0.001). rhPRG4 reduced the number of stress fiberpositive myofibroblasts, FAs mean size, and cell migration in TGF-β-treated NIH3T3 fibroblasts (p \u3c 0.05). rhPRG4 inhibited fibroblast migration in a macrophage and fibroblast co-culture model without altering active or total TGF-β levels. Synovial tissues of 9-month-old Prg4GT/GT animals had higher α-SMA, collagen type-I, and PLOD2 (p \u3c 0.001) content and Prg4 re-expression reduced these markers (p \u3c 0.01). Prg4 re-expression also reduced α-SMA and PLOD2 staining in CD44-deficient mice. Conclusion: PRG4 is an endogenous antifibrotic modulator in the joint and its effect on myofibroblast formation is partially mediated by CD44, but CD44 is not required to demonstrate an antifibrotic effect in vivo

Elinsiirron saaneen nuoren siirtyminen lasten ja nuorten hoitotyöstä aikuisten terveyspalveluiden käyttäjäksi

Opinnäytetyömme tarkoituksena on kuvata saumaton, hoitoon sitoutumista tukeva hoitopolku nuoren elinsiirtopotilaan siirtyessä lasten ja nuorten hoitotyöstä aikuisten terveyspalvelujen käyttäjäksi. Työmme on osa lasten ja nuorten hoitotyön osaamisen tulevaisuuden hanketta. Hankkeen tarkoituksena on uusien toimintakäytäntöjen luominen, verkostomaisen työskentelyn vahvistaminen, sekä saumattomien hoitopolkujen kehittäminen. Hankkeessa yhteistyökumppaneina ovat HYKS Naisten- ja lastentautien tulosyksikkö, Metropolia ammattikorkeakoulun Hoitotyön koulutusohjelma ja Tampereen yliopiston Hoitotieteen laitos. Työssämme keskitymme potilaan siirtymävaiheen solmukohtiin, kuvaamme nykyisen hoitopolun ja pyrimme löytämään näkökulmia sekä toimintamalleja, jotka antaisivat nuorelle, hänen perheelleen sekä hoitoyksikölle valmiuksia siirtymisprosessin vaiheisiin. Työssämme keskitymme nuorten kehittymishaasteisiin ja pyrimme kartoittamaan nuorten hoitomyönteisyyttä ja vastaanottavaisuutta edistäviä keinoja ja välineitä. Opinnäytetyömme aihe on uusi hoitotieteellisen tutkimuksen kohde ja löytämämme materiaali on luonteeltaan täsmällistä, tuoretta ja vastaa hyvin työmme edistymisen vaateisiin. Käytimme työssämme kvantitatiivista tutkimusmenetelmää. Tutkimustyön tarve sekä prosessin kehittäminen potilaan tarpeita vastaavaksi tällä hoitotyön saralla on erittäin tärkeää. Kansainvälisesti siirtymisessä koetaan haastavimmaksi prosessin alkamisen äkillisyys, riittämätön tiedonkulku lasten ja aikuisten puolen välillä ja tätä kautta hoidon jatkuvuuden kankeus. Toisin sanoen siirtymiseen valmistavien toimintojen aikaistaminen, kirjallinen informaatio ja sujuvampi yhteistyö palveluiden tarjoajien välillä, ovat suurimmat kehittymishaasteet

Hyaluronan concentration and size distribution in human knee synovial fluid: variations with age and cartilage degeneration

BACKGROUND: One potential mechanism for early superficial cartilage wear in normal joints is alteration of the lubricant content and quality of synovial fluid. The purpose of this study was to determine if the concentration and quality of the lubricant, hyaluronan, in synovial fluid: (1) was similar in left and right knees; (2) exhibited similar age-associated trends, whether collected postmortem or antemortem; and (3) varied with age and grade of joint degeneration. METHODS: Human synovial fluid of donors (23–91 years) without osteoarthritis was analyzed for the concentrations of protein, hyaluronan, and hyaluronan in the molecular weight ranges of 2.5–7 MDa, 1–2.5 MDa, 0.5–1 MDa, and 0.03–0.5 MDa. Similarity of data between left and right knees was assessed by reduced major axis regression, paired t-test, and Bland-Altman analysis. The effect of antemortem versus postmortem collection on biochemical properties was assessed for age-matched samples by unpaired t-test. The relationships between age, joint grade, and each biochemical component were assessed by regression analysis. RESULTS: Joint grade and the concentrations of protein, hyaluronan, and hyaluronan in the molecular weight ranges of 2.5–7 MDa, 1–2.5 MDa, and 0.5–1 MDa in human synovial fluid showed good agreement between left and right knees and were similar between age-matched patient and cadaver knee joints. There was an age-associated decrease in overall joint grade (–15 %/decade) and concentrations of hyaluronan (–10.5 %/decade), and hyaluronan in the molecular weight ranges of 2.5–7 MDa (–9.4 %/decade), 1–2.5 MDa (–11.3 %/decade), 0.5–1 MDa (–12.5 %/decade), and 0.03–0.5 MDa (–13.0 %/decade). Hyaluronan concentration and quality was more strongly associated with age than with joint grade. CONCLUSIONS: The age-related increase in cartilage wear in non-osteoarthritic joints may be related to the altered hyaluronan content and quality of synovial fluid